显微镜在临床的操作知识

光学显微镜是兽医临床诊疗中最常用的工具之一，常规的样本检验均需要使用光学显微镜，如血液、尿液、粪便、体腔液等，因此光学显微镜的使用尤为重要。那么关于光学显微镜的认识、使用、保养和维护，您知多少，希望以下的内容会给您带来一些帮助。

以下介绍光学显微镜结构的主要部分：

1. 目镜： 将物镜放大的实像进一步放大成一个起立的虚像，其作用相当于一个放大镜，但是目镜并不增加光学显微镜的分辨力。一般光学显微镜备有几个放大倍数不同的目镜，放大倍数会刻在目镜边缘，如 5x 、 10x 和 15x 等，临床最常用放大 10x 的目镜。

1. 物镜： 多数复式显微镜有 3 个或 4 个物镜，每个物镜的放大率都不同，多数物镜的放大倍数包括： 4x （扫描）、 10x （低倍）、 40x （高倍）和 100x （油镜）。物体的放大倍数为目镜的放大倍数乘以物镜的放大倍数，如物体放置在 4x 的物镜下，用 10x 目镜观察，镜下的放大倍数为 40x [ （ 4x ） X （ 10x ） ] 。

2. 聚光器： 作用是会聚由反射镜反射来的光线，增加标本的照明，升降聚光器，可调节照明强度和改变对比度。

3. 光圈环： 由十余片金属薄片组成，中心部分形成圆孔，通过旋转光圈环，可调节圆孔的大小，由此调节光线的强弱。

4. 粗准焦螺旋和细准焦螺旋： 调节物镜与标本之间的距离，使物镜的焦点对准标本，得到更清晰的图像，粗准焦螺旋旋转一周可使镜筒升降 20mm ，细准焦螺旋每旋转一周可使镜筒升降 0.1mm 或更小。

1 、调整合适的座椅高度和显微镜的摆放位置

对于长时间需要观看显微镜的临床工作者来说，这一点非常重要，主要是保证自己身体健康的情况下也能感受到工作的舒适。

合适的座椅高度：显微镜的摆放位置：1 ）显微镜应该长期放置在一个平坦、不需要挪动和不被震动的地方，应该远离离心机和振荡器；2 ）周围有足够的空间放置玻片和参阅书籍。

2. 使用光学显微镜的步骤

1. 调节粗准焦螺旋，将载物台调节到最低点，打开光源，检查目镜、物镜和 聚光器镜头，必要时进行清洁；

2. 将载玻片放置在载物台上，固定在样本固定器中间，旋转物镜转换器， 4x 物镜下扫查观察区域，获得样本的整体印象；

3. 旋转物镜转换器，在 10x 物镜下对准观察物，注意不要直接旋转物镜；

4. 在目镜下观察，调节目镜的距离，使双孔目镜观测的区域相近，直到双眼观察的视野相同；

5. 调节聚光器、光圈和粗准焦螺旋，使观察物位于焦点位置，旋转细准焦螺旋直到样本清楚聚焦；

6. 转换 40x 物镜，调节粗细准焦螺旋对样本进行聚焦，调节聚光器和光圈，使细节观察更为清晰；

7. 需要油镜观察细胞结构时，物镜转换到 4x 物镜下，对样本聚焦，滴加一滴显微镜浸油，直接旋转到 100x 油镜下，调节细准焦螺旋聚焦样本，调节聚光器和光圈，使样本观察更为清晰；

8. 使用完毕后，关掉电源或将光亮调到最小，将载物台调至最低位置，旋回 4x 物镜到原来的位置，拿走载玻片，必要时用镜头纸擦拭 100x 镜头。

1. 需要根据制造商提供的说明书对光学显微镜进行保养和维护；

2. 清洁镜头需要用到专用的镜头试纸，必要时使用清洁剂，如甲醇或二甲苯，注意甲醇和二甲苯易燃且有毒，避免直接用手接触，使用结束后立刻遮盖试剂瓶；

1. 准备一些备用灯泡，更换灯泡要在切断电源的情况下进行，待灯泡冷却后更换新的灯泡，要求灯泡型号一致，避免用手直接触碰灯泡，因为油脂会缩短灯泡寿命；

2. 避免显微镜放置于高温潮湿的地方，不使用时应该避光防尘保持，挪动显微镜时用双手，一只手托住显微镜底盘，另一只手握住镜臂。

1. 转换物镜时旋转物镜转换器，而不是直接转动物镜，避免滑脱物镜导致损伤；

2. 不可将高倍镜镜头与显微镜镜油接触，接触后及时用清洁剂擦拭干净；

3. 观察结束后先将油镜转换成低倍镜下，再拿走载玻片，避免损伤镜头，及时用擦镜纸擦拭油镜镜头；

4. 显微镜使用结束后，关闭电源或将光亮调至最小，不用时关闭电源，盖好防尘罩。

临床检验过程中，需要对样本进行显微镜观察，因此以下为样本检验的显微镜操作：

1.血细胞、细胞学、体腔液和分泌物染片

1. 低倍镜下扫查，调节粗细准焦螺旋，找到观察区域；

2. 转换高倍镜， 调低聚光器 ，调节光圈找到合适的光强度，旋转细准焦螺旋使样本更清晰；也可 滴加一滴镜油盖上盖玻片 ，在高倍镜下也能清晰的观察细胞（见图 2 ）；

3. 转换低倍镜，滴加镜油，旋转转换器到油镜下， 调高聚光器，使贴近于玻片，将光圈调大 ，旋转细准焦螺旋，清晰观察样本（见图 3 ）；

4. 观察结束，关闭电源或调低光亮至最小，调低载物台或旋转到低倍镜，拿走玻片，擦拭油镜镜头。

图2 两图均为高倍镜下的血细胞，左图为滴加一滴镜油，盖上盖玻片后显微镜下观察的结果；右图为未滴加镜油观察的结果（其他条件一致）。

图3 左图为犬皮肤肥大细胞瘤油镜下观察的结果；右图为犬血涂片油镜下观察的结果（升高聚光器贴近于玻片）

2.粪便、尿液、皮肤活片和染片

1. 粪便、尿液和皮肤活片低倍镜下扫查，调节粗细准焦螺旋，找到观察区域， 调低聚光器 ，增加对比度， 减少光圈 ，降低光强度，转换高倍镜下观察（注意盖上盖玻片，避免污染镜头），调节细准焦螺旋，清晰观察样本（见图 4 ）；

2. 粪便、尿液和皮肤涂片 低倍镜下扫查，调节粗细准焦螺旋，找到观察区域，旋转到高倍镜下，仔细扫查样本，需要油镜下观察时， 调高聚光器 ，贴近于玻片， 增大光圈 ，增强光强度，滴加镜油，转换到油镜下调节细准焦螺旋，清晰观察样本。

图4 两图均为粪便的活片，左图为降低聚光器显微镜结果；右图为未降低聚光器的显微镜结果。

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